慶應義塾大学日吉キャンパス 特色GP 文系学生への実験を重視した自然科学教育
生物学実験/イトマキヒトデの受精法
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開始行:
* イトマキヒトデの受精法 [#pf56ea95]
RIGHT:SIZE(9){画像をクリックすると拡大表示されます。}
#ref(生物学実験/タイトル画/Tヒトデ受精法.jpg,exif,right,w...
#contents
** はじめに [#s390220c]
イトマキヒトデの受精法を[[''1. 精子の単離''>#method1]]、...
** 材料 [#xbc20217]
-''イトマキヒトデ('''Asterina pectinifera''')''
**試薬 [#hb294b4c]
-''1 mM 1-methyladenine'':分子量149.15
#br
|BGCOLOR(#4f81bd):COLOR(white):1 mM 1-methyladenine 溶液...
|1-methyladenine|RIGHT:15 mg|
|蒸留水|RIGHT:100 ml|
-''海水''、または''人口海水''(マリンアートMARINEART®...
** 器具 [#t4a6c30f]
- ''ハサミ''
- ''ピンセット''
- ''パスツールピペット''
- ''ビーカー''
- ''直径9cmガラスシャーレ''
- ''15ml試験管''
- ''手回し遠心機''
**手順 [#p17ac32c]
+''イトマキヒトデの精子の単離''&aname(method1);
++オスのヒトデの腕の外皮にハサミを入れ、ピンセットで挟み...
++3 mlの海水が入った試験管に、取り出した精巣の一部を入れ...
++ii の海水をパスツールピペットで懸濁することで、精子を海...
#br
+''イトマキヒトデの卵の単離''&aname(method2);
++メスのヒトデの腕にハサミを入れ、オスの精巣と同様に卵巣...
++2腕分の卵巣を10 mlの海水が入った50mlビーカーに入れる。
++上清が濁っていた場合、上清を捨て新たな海水に変える。([[...
++iii のビーカーに1 mM 1-methyladenineを10 µl加え、...
++海水が入った9cmシャーレに卵巣をピンセットで移し、ハ...
++卵巣から出てきた卵を観察し、卵核胞がなくなっている事を...
++卵懸濁液を試験管に移し、手回し遠心機を用いて卵を集める。
++vii の上清を捨て、新たな海水10 mlで未受精卵を懸濁した後...
#br
+''受精法''&aname(method3);
++[[''1.''>#method1]] の作業で得た精子数滴(1-4滴)を [[...
++受精膜を確認した後、未授精卵の体積1mlあたり([[注2>#att...
++20℃の温度条件で、64細胞期は4時間、胞胚は16時間、中期原...
** ポイントやトラブルシューティング [#d445c29a]
- &aname(attention1);[[注1>#attention1r]]:濁ったまま作...
- &aname(attention2);[[注2>#attention2r]]:本作業を実施...
#br
**印刷用PDFマニュアル [#caf86bc1]
#ref(イトマキヒトデの受精法.pdf)
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* イトマキヒトデの受精法 [#pf56ea95]
RIGHT:SIZE(9){画像をクリックすると拡大表示されます。}
#ref(生物学実験/タイトル画/Tヒトデ受精法.jpg,exif,right,w...
#contents
** はじめに [#s390220c]
イトマキヒトデの受精法を[[''1. 精子の単離''>#method1]]、...
** 材料 [#xbc20217]
-''イトマキヒトデ('''Asterina pectinifera''')''
**試薬 [#hb294b4c]
-''1 mM 1-methyladenine'':分子量149.15
#br
|BGCOLOR(#4f81bd):COLOR(white):1 mM 1-methyladenine 溶液...
|1-methyladenine|RIGHT:15 mg|
|蒸留水|RIGHT:100 ml|
-''海水''、または''人口海水''(マリンアートMARINEART®...
** 器具 [#t4a6c30f]
- ''ハサミ''
- ''ピンセット''
- ''パスツールピペット''
- ''ビーカー''
- ''直径9cmガラスシャーレ''
- ''15ml試験管''
- ''手回し遠心機''
**手順 [#p17ac32c]
+''イトマキヒトデの精子の単離''&aname(method1);
++オスのヒトデの腕の外皮にハサミを入れ、ピンセットで挟み...
++3 mlの海水が入った試験管に、取り出した精巣の一部を入れ...
++ii の海水をパスツールピペットで懸濁することで、精子を海...
#br
+''イトマキヒトデの卵の単離''&aname(method2);
++メスのヒトデの腕にハサミを入れ、オスの精巣と同様に卵巣...
++2腕分の卵巣を10 mlの海水が入った50mlビーカーに入れる。
++上清が濁っていた場合、上清を捨て新たな海水に変える。([[...
++iii のビーカーに1 mM 1-methyladenineを10 µl加え、...
++海水が入った9cmシャーレに卵巣をピンセットで移し、ハ...
++卵巣から出てきた卵を観察し、卵核胞がなくなっている事を...
++卵懸濁液を試験管に移し、手回し遠心機を用いて卵を集める。
++vii の上清を捨て、新たな海水10 mlで未受精卵を懸濁した後...
#br
+''受精法''&aname(method3);
++[[''1.''>#method1]] の作業で得た精子数滴(1-4滴)を [[...
++受精膜を確認した後、未授精卵の体積1mlあたり([[注2>#att...
++20℃の温度条件で、64細胞期は4時間、胞胚は16時間、中期原...
** ポイントやトラブルシューティング [#d445c29a]
- &aname(attention1);[[注1>#attention1r]]:濁ったまま作...
- &aname(attention2);[[注2>#attention2r]]:本作業を実施...
#br
**印刷用PDFマニュアル [#caf86bc1]
#ref(イトマキヒトデの受精法.pdf)
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